Zaloguj się
Zakład Biochemii Mózgu
Profil naukowy
- O zakładzie
- Pracownicy
- Pracownie
Opis profilu badawczego
I. Neurobiologiczne i molekularne aspekty depresji, stresu, lęku i mechanizmy działania terapii przeciwdepresyjnych:
-
Badania roli układu noradrenergicznego w indukowanych stresem zmianach plastycznych w mózguInterakcje szlaków sygnałowych: receptory α1-adrenergiczne – stres komórkowy – apoptoza – badania w chronicznym nieprzewidywalnym stresie, modelu zwierzęcej depresji
- Udział podtypów (A, B i D) receptora α1–AR w mechanizmie działania leków przeciwdepresyjnych – badania w modelach komórkowych ze stabilną ekspresją poszczególnych podtypów α1–AR i u myszy knock-out pozbawionych określonych podtypów α1–AR.
- Neurochemiczne korelaty przywołania warunkowanego lęku: badanie ekspresji białek G w mózgu myszy w modelu warunkowania strachem i efektach morfiny
II. Badania w mysich modelach transgenicznych (system warunkowej/indukowanej rekombinazy Cre/loxP):
-
funkcja receptora glikokortykoidowego (GR) w depresji (myszy pozbawione receptora GR w układzie noradrenergicznym)rola czynnika transkrypcyjnego CREB w mechanizmie działania leków przeciwdepresyjnych (myszy pozbawione CREB w układzie noradrenergicznym lub serotoninowym)
- farmakologiczna weryfikacji potencjalnych strategii neuroprotekcyjnych w chorobach neurodegeneracyjnych (linie myszy z wywołaną miejscowo degeneracją komórek noradrenergicznych, dopaminowych lub dopaminoceptywnych)
III. Wpływ leków i niefarmakologicznych terapii przeciwdepresyjnych na układ odpornościowy
- Rola obwodowych makrofagów w depresji i działaniu terapii przeciwdepresyjnych
IV. Molekularne korelaty uzależnień lekowych
-
Badanie ekspresji podjednostek α białek G w mózgu, w szczurzych modelach uzależnienia od morfiny i kokainy
Metody badawcze
Behawioralne:
– testy: spontaniczna ruchliwość (OFT); zachowania depresyjne (TST, FST); lękliwość (LDB); motoryka i koordynacja ruchowa zwierzęcia (Rotarod) wykonywane z udziałem zautomatyzowanego systemu do analizy ruchowej EthoVision
– modele: stresu unieruchomienia; warunkowania strachem; modelowanie tolerancji i uzależnień lekowych: sensytyzacja, procedura samopodawania leków oraz modele nawrotu do uzależnienia kokainowego i morfinowego
– instrumentalne: podawanie elektrowstrząsów, implantacja stereotaktyczna kaniuli do określonych miejsc kory mózgowej (dmPFC) i podania leków do dmPFC; implantacja sztucznej żyły do żyły szyjnej szczura; izolacja struktur mógowych
Biochemiczne / molekularne:
– badania gęstości i powinowactwa receptorów: analiza wiązania radioligandów i autoradiografia receptorów; pomiar generacji wtórnych przekaźników (cykliczny AMP, fosforany inozytolu) z wykorzystaniem techniki HTRF, TR-FRET; ocena aktywności makrofagów metodami kolorymetrycznymi, ELISA i cytometrii przepływowej
– hodowla komórek układu odpornościowego; transfekcja in vitro i hodowle linii komórkowych ze stabilną ekspresją genów kodujących wybrane białka
– genotypowanie zwierząt techniką klasycznego PCR; ilościowe oznaczenia ekspresji mRNA (RealTime PCR, Northern blot); białka (WesternBlot, macierze białkowe); frakcjonowanie białek błonowych i wewnątrzkomórkowych; profilowanie ekspresji genów metodą mikromacierzy cDNA na komercyjnych platformach (Illumina/Affymetrix) oraz za pomocą tzw. mikromacierzy małej skali z sondami TaqMan (TLDA) na własnej platformie QuantStudio
Immunohistochemiczne – klasyczne techniki immunohistochemii i immunofluorescencji dla wizualizacji morfologii struktur mózgowych oraz jakościowej analizy wybranych białek; analiza mikroskopowa fluorescencyjna
Modele transgeniczne:
– oparte o system warunkowej/indukowanej rekombinazy Cre/loxP – myszy z selektywnie usuniętymi genami wyłącznie w specyficznych populacjach komórkowych
– oparte o technologię knock-out – myszy z unieczynnionymi genami kodującymi poszczególne podtypy receptorów α1–adrenergicznych (ABD-KO)
– model in vitro – linie komórek ze stabilną ekspresją poszczególnych podtypów receptorów α1–adrenergicznych
Najważniejsze odkrycia ostatnich lat
1. Stwierdzenie zależnych od płci różnic w odpowiedzi na mutację polegającą na selektywnym usunięciu receptora glukokortykoidowego z układu noradrenergicznego (linia myszy GRDBHCre): wykazanie w testach behawioralnych prodepresyjnego i prolękowego fenotypu samic i oporności na stres samców (publikacja: Chmielarz P., Kuśmierczyk J., Parlato R, Schütz G., Nalepa I., Kreiner G.: Inactivation of glucocorticoid receptor in noradrenergic system influences anxiety and depressive-like behavior in mice. PLoS One, 2013, 8, e72632)
2. Wykazanie, że wielokrotny stres separacji od matki w okresie postnatalnym (model clean bedding), skutkuje u dorosłych mysich osobników anhedonią – obniżeniem pobierania słodkiego pokarmu, spadkiem gęstości receptorów α1-adrenergicznych w korowo-limbicznych obwodach neuronalnych oraz zależnymi od struktury mózgu zmianami w ekspresji mRNA trzech podtypów receptora α1-adrenergicznego, białek szoku cieplnego (Hsp72, Hsp90) oraz białek rodziny Bcl2 (publikacja: Coccurello R., Bielawski A., Zelek-Molik A., Vetulani J., Kowalska M., D’Amato F.R., Nalepa I.: Brief maternal separation affects brain α1-adrenoceptors and apoptotic signaling in adult mice. Prog. Neuropsychopharmacol. Biol Psychiatry, 2014, 48, 161-169).
Pracownicy zakładu
prof. dr hab. Irena Nalepa
+48 12 6623225
nalepa@if-pan.krakow.pl
pokój 39dr Piotr Chmielarz
+48 12 6623227chmiel@if-pan.krakow.plpokój 37Adr hab. Danuta Jantas
+48 12 3343721jantas@if-pan.krakow.plpokój 2.1dr Agnieszka Zelek-Molik
+48 12 6623227zelek@if-pan.krakow.plpokój 36dr Justyna Barut
+48 12 6623245jbarut@if-pan.krakow.plpokój 43dr Adam Bielawski
+48 12 6623381bielaw@if-pan.krakow.plpokój 37dr Jolanta Konieczny
+48 12 6623227koniecz@if-pan.krakow.plpokój 338dr Katarzyna Rafa-Zabłocka
+48 12 6623227zablocka@if-pan.krakow.plpokój 36mgr Katarzyna Maziarz
+48 12 6623245maziarz@if-pan.krakow.plpokój 43mgr Michał Wilczkowski
+48 12 6623245wilczkow@if-pan.krakow.plpokój 43mgr Anna Alwani
+48 12 662 32 45alwani@if-pan.krakow.plpokój 43mgr Zuzanna Biel
+48 12 3343700biel@if-pan.krakow.plpokój 2.6mgr inż. Zuzanna Wilk
wilk@if-pan.krakow.plmgr Patrycja Mieszczak
mieszcz@if-pan.krakow.plmgr Klaudiusz Gorka
gorka@if-pan.krakow.pldr Magdalena Zaniewska
+48 12 3343721zaniew@if-pan.krakow.plpokój 2.1Pracownicy pracowni
dr hab. Katarzyna Kuter-Nowak
+48 12 6623226kuter@if-pan.krakow.plpokój 3.36dr hab. Elżbieta Lorenc-Koci
+48 12 6623272lorenc@if-pan.krakow.plpokój 338dr Joanna Kula
+48 12 6623286jkula@if-pan.krakow.plpokój 337dr Agata Maziak
+48 12 6623383maziak@if-pan.krakow.plpokój 340mgr Emilija Napieralska
+48 12 3623286napieral@if-pan.krakow.plpokój 3.37dr Małgorzata Sobocińska
sobocin@if-pan.krakow.plpokój 3.40Dokonania naukowe
- Publikacje
- Granty
- Nagrody
Grant
Wzajemne oddziaływanie neurochemii i biologii nowotworów: w poszukiwaniu nowej terapii glejaka wielopostaciowego pośród ligandów receptorów dopaminowych Konsorcjant w projekcie SONATA 17 UMO-2021/43/D/NZ7/00891
Dr hab. Danuta Jantas
Grant
Projekt PASIFIC Call 1 TheraLanOx "Neuroprotective properties of theranostic lanthanide oxide nanoparticles against neurotoxin-induced cellular models of Parkinson’s disease"
Dr Rugmani Meenambal
Grant
Węglowe kompozyty hybrydowe do stymulacji komórek centralnego układu nerwowego Konsorcjant w projekcie OPUS 20 2020/39/B/ST5/02126
Dr hab. Danuta Jantas
Grant
Badanie wpływu postępującej neurodegeneracji układu noradrenergicznego na funkcjonowanie układu dopaminowego w kontekście presymptomatycznej fazy choroby Parkinsona OPUS13 2017/25/B/NZ7/02406
Dr hab. Grzegorz Kreiner
Grant
Różnicowanie udziału trzech podtypów receptora alfa(1)-adrenergicznego w efektach leków przeciwdepresyjnych: badania w oparciu o genetyczne modele in vitro oraz in vivo OPUS9 2015/17/B/NZ7/03018
Prof. dr hab. Irena Nalepa
Grant
Zanieczyszczenia powietrza a choroby autoimmunologiczne: rola wielofazowej chemii nieorganicznej SYMFONIA3: APARIC 2015/16/W/ST5/00005
Prof. dr hab. Irena Nalepa
Grant
Ocena roli czynnika transkrypcyjnego CREB w mechanizmach działania leków przeciwdepresyjnych OPUS7 2014/13/B/NZ7/02293
Dr hab. Grzegorz Kreiner
Grant
Określenie roli receptora mGluR8 w komórkach nowotworowych - potencjalny punkt uchwytu dla nowych strategii przeciwnowotworowych Grant NCN OPUS 3 2012/05/B/NZ3/00452.
Dr hab. Danuta Jantas
Grant
Farmakologiczna weryfikacja potencjalnych strategii neuroprotekcyjnych w nowych, genetycznych modelach progresywnej neurodegeneracji u myszy, opartych o system selektywnie indukowanych mutacji Cre/loxP OPUS2 2011/03/B/NZ7/05949
Dr hab. Grzegorz Kreiner
Grant
Ocena neuroprotekcyjnych właściwości ligandów metabotropowych receptorów glutaminianergicznych grupy II i III w modelach apoptozy in vitro i in vivo Grant KBN nr N N405 611638.
Dr hab. Danuta Jantas
Grant
Badanie interakcji szlaków sygnałowych: receptory alfa1-adrenergiczne – stres komórkowy – apoptoza, w modelu chronicznego łagodnego stresu - zadanie 1.4 POIG.01.01.02-12-004/09 DeMeTer (Depresja – Mechanizmy – Terapia) Działanie 1.1 Poddziałanie 1.1.2. Zadanie główne: Modelowanie depresji – strategia poznawania jej etiologii.
Prof. dr hab. Irena Nalepa
Grant
Badanie interakcji układu noradrenergicznego i glukokortykoidowego w nowym modelu genetycznym i ocena jego przydatności jako modelu depresji u myszy - zadanie 1.2 POIG 01.01.02-12-004/09 DeMeTer (Depresja – Mechanizmy – Terapia). Działanie 1.1 Poddziałanie 1.1.2. Zadanie główne: Modelowanie depresji – strategia poznawania jej etiologii.
Dr hab. Grzegorz Kreiner
Grant
Funkcja in vitro: funkcjonalna aktywność nowych ligandów receptora serotoninowego 5HT(6) i dopaminowego D(2) na poziomie modulacji odpowiedzi wtórnych przekaźników zadanie nr 6 GRANT POIG ProKog Nr UDA-POIG.01.03.01-12-063/09-02 Działanie 1.3, Poddziałanie 1.3.1: Antagoniści receptora 5HT(6): nowoczesne leki przeciwpsychotyczne o dodatkowym działaniu prokognitywnym
Prof. dr hab. Irena Nalepa
Nagroda
2009 - Young Investigator Award, Neuropeptides Festival, Salzburg, Austria.
Dr hab. Danuta Jantas
Opposite effect of simple tetrahydroisoquinolines on amphetamine- and morphine-stimulated locomotor activity in mice
Vetulani, J., Nalepa, I., Antkiewicz-Michaluk, L., Sansone, M.
DOI: 10.1007/s007020170053
Splenectomy and adoptive cell transfer reveal a prominent role for splenic memory lymphocytes in the development of chronic relapsing experimental autoimmune encephalomyelitis
Yang, J., Kubera, M., Zelek-Molik, A., Nalepa, I., Hukkanen, V., Lindsberg, P.J., Meri, S., Seljelid, R.
DOI: 10.1046/j.1365-3083.2000.00791.x
Antidepressants: Past, present and future
Vetulani, J., Nalepa, I.
DOI: 10.1016/S0014-2999(00)00565-3
Different regulation of phospholipase D activity in glioma C6 cells by sphingosine, propranolol, imipramine and phorbol ester
Bobeszko, M., Dygas, A., Nalepa, I., Barańska, J.
DOI: 10.1016/S0898-6568(00)00078-4
Haloperidol treatment selectively affects expression of Gαi3 subunit mRNA in specific regions of the rat brain
Sanak, M., Kreiner, G., Kowalska, M., Nalepa, I., Vetulani, J.
DOI:
Adrenergic receptors' responsiveness after acute and chronic treatment with haloperidol in the presence of calcium channel blockade
Nalepa, I., Kreiner, G., Kowalska, M., Sanak, M., Vetulani, J.
DOI:
Pharmacological actions of the antidepressant venlafaxine beyond aminergic receptors
Rossby, S.P., Manier, D.H., Liang, S., Nalepa, I., Sulser, F.
DOI: 10.1017/S1461145799001273
Lack of β adrenoceptor desensitization in brain following the dual noradrenaline and serotonin reuptake inhibitor venlafaxine
Nalepa, I., Manier, D.H., Gillespie, D.D., Rossby, S.P., Schmidt, D.E., Sulser, F.
DOI: 10.1016/S0924-977X(97)00078-3
Does Ca<sup>2+</sup> channel blockade modulate the antidepressant-induced changes in mechanisms of adrenergic transduction?
Nalepa, I., Kowalska, M., Kreiner, G., Vetulani, J.
DOI: 10.1007/BF01277670